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    PCR核酸检测试剂盒是怎么利用PCR技术完成检测的?

    点击次数:35 发布时间:2022-01-22
     
      PCR核酸检测试剂盒检测原理是以病毒独特的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使我们的选择这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累计的荧光信号就越强。所以,核酸检测,其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有问题。
     
      PCR核酸检测试剂盒,PCR就是聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR),可使特定DNA的片段进行体外快速扩增。什么意思呢?就是用PCR技术,可以把一段DNA序列成千上万倍地复制粘贴。就是“变性、退火、延伸”这三个步骤的不断循环。
     
      具体来说,这三个步骤的实现方法是:
     
      1、变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,为下轮反应作准备;
     
      2、退火:退火也叫复性,模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,在这个温度下,模板DNA单链能够与引物的互补序列配对结合;所谓引物,是一段已经确定好DNA的片段,通过引物找到模板DNA的相应位置,也就是确定了复制的起点;
     
      3、延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸,可构成DNA)为反应原料,靶序列为模板,按照碱基互补配对原则和半保留复制原理,就能合成一条新的与模板DNA链互补的复制链。
     
      PCR核酸检测试剂盒通过提取样本中的RNA,通过PCR技术,先逆转录形成DNA,再对DNA进行扩增,最后以荧光的方式读取信号。如果PCR检测到足够强的信号,那么就可以说样本中存在问题,反之则说明没有问题。
     
     
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